 |
 |
La réaction hypersensible du caféier à Hemileia vastatrix,
agent de la rouille orangée : caractérisation cytologique
et moléculaire
D. Fernandez(1), M.C. Silva(2), P. Santos(2), A.-S. Petitot(1),
L. Guerra-Guimaraes(2), A. Ribeiro(2) et M. Nicole(1)
(1) IRD - Institut de Recherche pour le Développement, UMR 1097
Diversité et génome des Plantes Cultivées, Equipe
Résistance des Plantes, 911 avenue Agropolis, BP64501, 34394 Montpellier
Cedex 5, France.
(2) Centro de Investigação das Ferrugens do Cafeeiro (CIFC),
Quinta do Marquês, 2784-505 Oeiras, Portugal
L'interaction entre le caféier (Coffea arabica L.) et le champignon
Hemileia vastatrix, responsable de la rouille orangée, est gouvernée
par une relation de type gène - pour - gène. La résistance
spécifique du caféier s'exprime par une réaction
hypersensible (RH) qui se caractérise au niveau cellulaire par
la mort de cellules végétales au site d'infection (stomate)
à partir de 48 h après inoculation (a. i.). Quatre jours
a. i. la croissance du champignon est totalement bloquée, les haustoria
étant encapsulés dans un matériel contenant de la
callose et de la cellulose. Au niveau biochimique, l'accumulation rapide
de composés phénoliques a été mise en évidence
ainsi que des pics d'activités peroxydase et phenylalanine ammonia
- lyase avant l'observation de la mort cellulaire. Une activité
peroxydase a été détectée par immunocytochimie
au niveau des stomates et du mésophylle aux sites d'infection.
Pour identifier et caractériser les gènes activés
spécifiquement au cours de la mise en place de la RH, une approche
EST a été développée. Des banques d'ADNc enrichies
en séquences surexprimées lors de la RH ont été
construites 12, 24 et 48 h a. i. en utilisant la méthode d'hybridation
soustractive suppressive (SSH). La comparaison des ESTs classées
par catégories fonctionnelles dans chacune des banques a montré
qu'une modification du transcriptome se produisait environ 24 h a. i.,
associée à la mise en place de la RH. L'étude de
la régulation de l'expression de clones candidats a permis d'identifier
9 gènes présentant une surexpression spécifique lors
de la RH, 24 à 48 h a. i. Deux des gènes régulés
codent potentiellement des homologues des protéines DND1 et NDR1
d'Arabidopsis thaliana.. Les autres gènes coderaient des protéines
impliquées dans la signalisation, la régulation génique
ou la réponse aux stress et une protéine dont les fonctions
sont inconnues. Ces résultats, associés aux données
de cytologie, suggèrent que ces gènes pourraient être
impliqués dans les mécanismes de résistance du caféier
à H. vastatrix.
|